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  • 杂志名称:河北医药杂志
  • 主管单位:河北省卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:河北省医学情报研究所
  • 国际刊号:1002-7386
  • 国内刊号:13-1090/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:河北省优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
河北医药杂志2014年第22期

蛋白激酶C 参与内源性大麻素花生四烯乙醇胺对L型钙电流的抑制作用

郝桂敏;崔娜;李学慧;李茜

关键词:内源性大麻素, 内源性大麻素受体, 花生四烯乙醇胺, 蛋白激酶C, L型钙电流
摘要:目的:研究内源性大麻素物质花生四烯乙醇胺是否通过改变蛋白激酶C( PKC)活性从而抑制心肌L型钙电流,并进一步探讨可能改变PKC活性的信号途径。方法应用全细胞膜片钳技术记录单个心肌细胞的L型钙电流(P <0 n.05);应用PepTag非放射性蛋白激酶C检测系统( Promega)检测PKC活性;Elisa试剂盒测定细胞中二脂酰甘油( DAG)的含量;western blot 技术测定磷脂酶Cβ( PLCβ)和磷酸化磷脂酶C β( p-PLCβ)表达。结果应用花生四烯乙醇胺灌流心肌细胞后显著抑制心肌L型钙电流( P <0.05),预先应用大麻素1型受体( CB1)阻断剂AM251或PKC非特异性激动剂佛波醇酯(PMA)可以完全阻断此抑制效应,而大麻素2型受体(CB2)阻断剂AM630没有阻断花生四烯乙醇胺抑制L型钙电流的作用。检测心肌细胞PKC活性发现,花生四烯乙醇胺明显抑制PKC活性( P <0.05),同样预先应用AM251或PMA完全阻断花生四烯乙醇胺对PKC活性的抑制效应,而AM630无此效应。应用花生四烯乙醇胺没有影响心肌细胞DAG含量和PLCβ的磷酸化。结论本实验首次证明内源性大麻素花生四烯乙醇胺激活心肌细胞CB1受体后抑制细胞PKC的活性,从而抑制L型钙电流,此过程没有PLCβ-DAG途径参与。